Diseño del proceso fermentativo del polipéptido antitumoral recombinante P25 expresado en Escherichia coli

Diseño del proceso fermentativo del polipéptido antitumoral recombinante P25 expresado en Escherichia coli

Ciencias farmacéuticas

Ciencias Sociales

El cáncer se ha convertido en una de las principales causas de muerte a nivel mundial y la primera en Cuba, por esta razón se ha incrementado el interés por obtener fármacos con efecto antitumoral. En el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología se aisló un polipéptido novedoso derivado de regresión tumoral mediada por infección con Serratia marcescens, denominado polipéptido P25. Esta molécula es la primera de su tipo, con amplio espectro de acción y selectividad sobre células tumorales. Sin embargo, debido a las limitantes de su obtención por vía natural, fue necesario expresarla de forma recombinante en Escherichia coli, para diseñar un proceso fermentativo capaz de garantizar las cantidades necesarias de producto con la calidad requerida para su uso inyectable en seres humanos. Como parte de este trabajo se seleccionó la cepa de Escherichia coli W3110 para expresar el polipéptido recombinante, se elaboraron y caracterizaron los bancos celulares primario y de trabajo. Se establecieron condiciones favorables a escala de banco para el crecimiento y la expresión de la proteína heteróloga mediante un diseño experimental fraccionado 2 6-3, donde los mejores resultados fueron 12,2 unidades de densidad óptica y 17,2% de expresión. Mediante la aplicación de la herramienta Análisis modal de fallas y efectos se valoraron como riesgos potenciales de fallas en el proceso de fermentación: la presencia de fagos, incorrecta manipulación durante operaciones críticas del proceso y la insuficiente capacitación del personal. Posteriormente, se realizó el escalado de la etapa de fermentación a nivel de 50 L de volumen efectivo, mediante la aplicación de los criterios de potencia por unidad de volumen y volumen de aire/ volumen de medio/ minuto (v.v.m.) constante. Un análisis de varianza demostró que no existen diferencias significativas entre ambas escalas.

García Suárez, José

Abrahantes Pérez, María del Cármen (Director)

Barrios Álvarez, María Aurora (Director)

Quintana Esquivel, Marisel (Director)

Zumalacarregui de Cárdenas, Lourdes M. (Director)

Editorial Universitaria

2015

Cuba, Ministerio de Educación Superior

pdf Interactivo (2,9 Mb)

Español

Texto

La Habana