Obtención de nuevos candidatos vacunales contra el virus influenza aviar basados en la hemaglutinina subtipo H5 fusionada a la molécula CD154 de Gallus gallus

Obtención de nuevos candidatos vacunales contra el virus influenza aviar basados en la hemaglutinina subtipo H5 fusionada a la molécula CD154 de Gallus gallus

Ciencias biológicas

Ciencias de la Educación

En el presente trabajo se obtuvieron nuevos inmunógenos contra el virus influenza aviar subtipo H5N1, mediante el uso de un adyuvante molecular como potenciador de la respuesta inmune en pollos. Las construcciones genéticas se realizaron con genes sintéticos que contenían la secuencia nucleotídica del segmento expuesto de la hemaglutinina (HA) subtipo H5 del virus influenza aviar o de la fusión entre la HA y el segmento expuesto del adyuvante molecular CD154 de pollo (HACD). Los genes se insertaron en el genoma de vectores adenovirales (AdHA y AdHACD) y se expresaron en células de mamíferos mediante transducción adenoviral. Las células transducidas secretaron las proteínas HA y HACD al sobrenadante de cultivo. La inmunización de pollos con el vector AdHACD y con la proteína HACD contenida en el sobrenadante de cultivo (HACDsc), indujo títulos de anticuerpos inhibidores de la hemaglutinación (AIH) significativamente superiores a los títulos de AIH obtenidos con el vector AdHA o la proteína HA. Este resultado demostró la superioridad inmunogénica de la molécula HACD respecto a la molécula HA. La purificación de la proteína HACD mediante cromatografía de exclusión molecular (CEM) proporcionó un inmunógeno con una pureza de 75-80 %. Su emulsión en Montanide 888 (M888) indujo títulos de AIH en los pollos inmunizados. La proteína HACD purificada por cromatografía de inmunoafinidad mediante elución a pH ácido o con un agente caotrópico se obtuvo a un 98 % de pureza. Sin embargo, sus emulsiones en M888 no indujeron AIH. El incremento de los transcriptos de IFN-?? inducido por el vector AdHACD y los inmunógenos HACDsc/M888 o HACDCEM/M888 fue significativamente superior al detectado con el vector AdHA o el inmunógeno HAsc/M888. No se obtuvieron diferencias significativas en el incremento de los transcriptos de IFN-?? inducido por los inmunógenos HACDsc/M888 y HACDCEM/M888. Los resultados obtenidos indican que la fusión del segmento expuesto de la HA con el segmento expuesto

González Pose, Alaín

Noda Gómez, Julia (Director)

Editorial Universitaria

2013

Cuba, Ministerio de Educación Superior

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Español

Texto

La Habana